Oligo sintezatorining printsipi
Molekulyar biologiya va genetika tadqiqotlari sohalarida DNKni sintez qilish qobiliyati hal qiluvchi rol o'ynaydi.DNK sintezi nukleotidlarni ma'lum bir tartibda joylashtirish orqali DNK molekulalarini sun'iy ishlab chiqarishni o'z ichiga oladi.Bunga erishish uchun olimlar oligonukleotid sintezatori, DNK sintezatori sifatida ham tanilgan kuchli vositaga tayanadilar.
Oligonukleotid sintezatori - bu oligonukleotidlar deb ataladigan qisqa DNK molekulalarini avtomatik ravishda sintez qiladigan murakkab asbob.Ushbu qisqa DNK iplari odatda 10 dan 100 gacha nukleotidlardan iborat bo'lib, polimeraza zanjiri reaktsiyasi (PCR), gen sintezi, genetik muhandislik va DNK ketma-ketligi kabi turli xil ilovalarda muhim qurilish bloklari hisoblanadi.
Oligonukleotid sintezatorlari deb nomlanuvchi texnika printsipi asosida ishlaydiqattiq fazali sintez.Bu usul birinchi marta 1970-yillarda Nobel mukofoti laureati doktor Marvin Karuters tomonidan kashf etilgan va DNK ketma-ketliklarining sintezini kuchaytirish uchun yillar davomida takomillashtirildi.Oligonukleotid sintezi kerakli ketma-ketlik yig'ilgunga qadar o'sayotgan zanjirning 5'-uchiga nukleotid qoldiqlarini bosqichma-bosqich qo'shish orqali amalga oshiriladi.Har bir qo'shilish sintez tsikli deb ataladi va to'rtta kimyoviy reaktsiyadan iborat:
1-qadam: Blokdan chiqarish (detritilatsiya)---------2-qadam: Ulanish ---------3-qadam: Yopish -----------4-qadam: Oksidlanish
Bu jarayon har bir nukleotid uchun kerakli ketma-ketlik olinmaguncha takrorlanadi.Uzunroq oligonükleotidlar uchun butun ketma-ketlikni sintez qilish uchun bu tsiklni bir necha marta takrorlash kerak bo'lishi mumkin. Sintez siklining har bir bosqichini aniq nazorat qilish qobiliyati oligonukleotid sintezatori uchun juda muhimdir.Nukleotidlar va aktivatorlar kabi ishlatiladigan reagentlar aniq va samarali sintezni ta'minlash uchun yuqori sifatli bo'lishi kerak.Bundan tashqari, sintezatorlar yuqori aniqlikdagi haroratni nazorat qilish va boshqa atrof-muhit sharoitlarini kerakli ulanish reaktsiyalarini rag'batlantirish va kiruvchi reaktsiyalarning oldini olish uchun talab qiladi.
Oligonukleotid to'liq sintez qilingandan so'ng, u odatda qattiq tayanchdan ajratiladi va qolgan himoya guruhlari yoki aralashmalarni olib tashlash uchun tozalanadi.Keyin tozalangan oligonükleotidlar quyi oqimdagi ilovalar uchun tayyor bo'ladi.
Texnologiyaning rivojlanishi bir vaqtning o'zida yuzlab va hatto minglab oligonukleotidlarni sintez qila oladigan yuqori samarali oligonukleotid sintezatorlarini yaratishga imkon berdi.Ushbu asboblar mikroarray asosidagi sintez texnologiyasidan foydalanadi, bu tadqiqotchilarga turli tadqiqot maqsadlari uchun katta oligonukleotid kutubxonalarini tezda yaratishga imkon beradi.
Xulosa qilib aytganda, oligonukleotid sintezatorlari ortidagi tamoyillar qattiq tayanchga nukleotidlarni bosqichma-bosqich qo'shishni o'z ichiga olgan qattiq fazali sintez usullari atrofida aylanadi.Sintez siklini aniq nazorat qilish va yuqori sifatli reagentlar aniq va samarali sintez uchun zarurdir.Oligo sintezatorlari DNK tadqiqotlarida muhim rol o'ynaydi, bu olimlarga turli xil ilovalar uchun maxsus oligonükleotidlarni yaratishga imkon beradi, biotexnologiya va genetik tadqiqotlardagi yutuqlarga hissa qo'shadi.
Yuborilgan vaqt: 2023 yil 01-avgust