Mos keladigan taxtalar | 1, 3, 5, 8. |
Filtrlash | zarba filtrlash, so'rg'ich filtrlash |
Inyeksiya portlari soni | 5, 6, 7, 8, 9, 10. |
Mos keladigan plastinka turlari | C18 plastinka, chuqur quduq plitasi, sintetik plastinka (ko'pchilik sintetik plitalarga mos keladi), mikrotitr plitasi |
Modul | bitta eksa yoki ikki o'q |
Kuchlanishi | 220V |
Kafolat | 1 yil |
Maxsus | Qabul qilingan |
1. Jel elektroforez xromatografiyasini tozalash
Tozalash uchun denaturatsiya qiluvchi poliakrilamid gel elektroforez xromatografiyasidan foydalaning.Denaturatsiya qiluvchi vosita odatda 4M formamid yoki 7M karbamid bo'lib, akrilamid konsentratsiyasi 5-15% gacha, metakrilamidning ulushi asosan 2-10% gacha.
Elektroforezdan so'ng, ultrabinafsha nurlanishida nuklein kislota tasmasining holatini aniqlash kerak, maqsadli nuklein kislotasi bo'lgan jel kesiladi, nuklein kislota parchalanadi va yuviladi, so'ngra yuvish eritmasi konsentratsiyalanadi, tuzsizlanadi, miqdoriy va liyofillangan.
2. DMT-On, HPLC Purification
Sintez paytida DMT-On rejimini tanlang, xom mahsulot santrifüj qilingan va aminolizdan keyin ortiqcha ammiakni olib tashlash uchun xona haroratida konsentrlangan.
Eluent sifatida asetonitril va 10% trietilamin-sirka kislotasi (TEAA) bo'lgan C18 kolonkasi yordamida ajratish amalga oshirildi.Elutsiya tugagandan so'ng, u konsentratsiyalanadi, so'ngra DMT guruhi trifluoroasetik kislota bilan chiqariladi.Neytrallashgandan so'ng, ba'zi tuzlar va kichik molekulalar kesish trubkasi orqali chiqariladi va nihoyat tuzsizlanadi.
Ushbu usul yuqori tozalikka ega mahsulotni olishi mumkin, ammo depurinatsiyaning paydo bo'lishiga e'tibor berish kerak.
3. DMT-Off, HPLC tozalash
Sintez paytida DMT-Off ni tanlang va xom mahsulot santrifüj qilindi va ammonolizdan keyin ortiqcha ammiakni olib tashlash uchun xona haroratida konsentratsiya qilindi.
Ajratish eliment sifatida suvda asetonitril va 10% trietilamin-sirka kislotasi bo'lgan C18 kolonkasi yordamida amalga oshirildi.Ajratish tugallangandan va miqdori aniqlangandan so'ng, alikvotlar liofilizatsiya qilinadi.
Bu usul ajratish sharoitlarini sinchkovlik bilan sozlashni talab qiladi va nisbatan sof maqsadli molekulalarni ham olishi mumkin.